加油新學(xué)期

謹記：對抗污染，預防大于一切！

在細胞培養過(guò)程中，很多小伙伴兒一直受到支原體污染的困擾，我自己養的細胞曾經(jīng)也遇到過(guò)支原體污染，深受其害呀！針對于支原體污染來(lái)說(shuō)，大家一定注意預防！如果已經(jīng)發(fā)現了一絲絲污染跡象，就要做到早發(fā)現、早挽救！如果細胞能夠救回來(lái)，還是可以繼續實(shí)驗的，不耽誤實(shí)驗進(jìn)度。不過(guò)，確實(shí)也很難*清除??！如果說(shuō)實(shí)在救不回來(lái)，那就再買(mǎi)一株新的細胞吧！最后，要買(mǎi)細胞的同學(xué)和老師，可以電話(huà)或郵箱聯(lián)系我們哦！

支原體污染對細胞培養造成多方面的不良影響，已經(jīng)成為在細胞培養時(shí)的一個(gè)嚴重問(wèn)題，嚴重干擾實(shí)驗結果的可信度。因此，定期進(jìn)行支原體檢測和去除，確保無(wú)支原體存在細胞培養體系內才能獲得準確有效的實(shí)驗數據。

什么是支原體（Mycoplasma）

支原體是1898年Nocard等發(fā)現的一種類(lèi)似細菌但不具有細胞壁的原核微生物，能在無(wú)生命的人工培養基上生長(cháng)繁殖，直徑50-300nm，能通過(guò)細菌濾器。過(guò)去曾稱(chēng)之為類(lèi)胸膜肺炎微生物（pleuropneumonia-like organism，PPLO）。1967年正式命名為支原體。

支原體又稱(chēng)霉形體，支原體細胞中可見(jiàn)的細胞器只有核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。支原體是目前發(fā)現的smallest、simplest的原核生物，可以輕松地通過(guò)濾膜，混入培養系統中，呈高度多形性，多數呈球形，也有桿形、絲狀、分支狀等多種形態(tài)。通常依附在細胞膜表面，支原體沒(méi)有剛性的細胞壁，因此普通的抗生素對它根本不起作用，實(shí)驗室常見(jiàn)的種類(lèi)有：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。

支原體污染的后果

細菌和真菌造成的污染相對比較容易檢測、預防和去除，然而支原體造成的污染很難察覺(jué)，即使生長(cháng)密度高達 10^7-10^9 CFU/mL，也很難有污染跡象（渾濁、pH變化等）。支原體污染后會(huì )導致細胞生長(cháng)變慢，狀態(tài)變差，不會(huì )馬上使細胞致死，但會(huì )影響細胞內的各種參數，如改變細胞膜抗原性，改變細胞新陳代謝，干擾核酸的合成，改變 DNA 轉染效率，導致染色體畸變等。 

支原體污染來(lái)源

1. 工作環(huán)境的污染

2. 培養基或其他試劑的污染

3. 污染支原體的細胞造成的交叉污染

4. 實(shí)驗器材帶來(lái)的污染

5. 操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)

6. 用來(lái)制備細胞的原始組織或器官的污染。

1. 疑似支原體污染，可通過(guò)檢測來(lái)確認是否污染；

2. 經(jīng)檢測沒(méi)有發(fā)現支原體污染，可采用支原體預防試劑，在平時(shí)實(shí)驗中做好環(huán)境和實(shí)驗用具的消毒工作；

3. 經(jīng)檢測確為支原體污染，使用支原體去除試劑進(jìn)行挽救；如果救不回來(lái)的，只能重新復蘇一管或者引進(jìn)新的細胞；如果能夠挽救回來(lái)，后續實(shí)驗中要定期采用支原體預防試劑，避免支原體的污染。

細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養基 | 血清 | 細胞培養添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測序分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實(shí)驗 | RIP 實(shí)驗 | ChIP實(shí)驗 | Co-IP實(shí)驗 | 質(zhì)譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等。

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